布魯氏菌病是一種亞急性或慢性的疾病，可造成多種動物發(fā)病，本質(zhì)上是一種動物疾病，特別是家畜易發(fā)病，由布魯氏菌屬的細(xì)菌引起發(fā)病，人類可作為宿主偶爾攜帶這類細(xì)菌。偏好與人畜共患病潛能特征有差異的細(xì)菌，主要為：羊布魯氏菌，豬布魯氏菌，流產(chǎn)布魯氏菌和犬布魯氏菌。

　　布魯氏菌檢測試劑盒利用實(shí)時熒光PCR原理，主要用于布魯氏菌的定性篩查檢測。檢測原理如下:

　　以基因工程表達(dá)布魯氏菌蛋白作檢測和捕獲抗原，采用“雙抗原夾心法”膠體金免疫技術(shù)設(shè)計，標(biāo)記膠體金的抗原與樣本中特異性抗體形成復(fù)合物，復(fù)合物在NC膜爬行的過程中與被包被在檢測線上的抗原特異性結(jié)合而被固定和富集于檢測線，使檢測線顯紅色反應(yīng)，以試劑檢測線顯色與否反應(yīng)來判斷樣品是否存在布魯氏菌抗體。

　　布魯氏菌檢測試劑盒操作步驟：

　　1.從試劑盒中分別取出熒光反應(yīng)液、陰性對照、陽性對照。

　　2.在室溫下溶解后，充分震蕩混勻，瞬時離心。

　　3.取出PCR八連管，放在PCR板上。

　　4.在PCR八連管內(nèi)分裝熒光反應(yīng)液，分別向多個PCR管中加入提取好的樣品核酸，其余兩個管內(nèi)分別加入陰性對照和陽性對照。完成后蓋上管蓋，并在右上角做好標(biāo)記。

　　5.將標(biāo)記好的PCR八連管放入儀器震蕩混勻后瞬時離心，取出后拿起觀察有無氣泡。

　　6.打開熒光定量PCR儀器，將PCR八連管放入卡槽中，蓋上儀器。

　　7.點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)程序，選擇新建實(shí)驗(yàn)，點(diǎn)擊運(yùn)行程序，并按照PCR八連管標(biāo)記順序依次選擇孔位信息：待測樣本、陽性對照、陰性對照。

　　8.點(diǎn)擊開始按鈕，運(yùn)行實(shí)驗(yàn)。

　　9.實(shí)驗(yàn)完成后，在屏幕查看實(shí)驗(yàn)結(jié)果，點(diǎn)擊詳細(xì)數(shù)據(jù)可查看實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行數(shù)據(jù)回顧。